Vaistų sukelta hemolizine anemija, priežastys ir gydymas

Svorio netekimas Waltham ma

Splenomegalija, padidėjęs blužnis Diagnozė Narkotikų sukeltos hemolizinės anemijos diagnozė prasideda, pavyzdžiui, daugumai anemijos formų, kai kraujo tyrimai atliekami visiškai. Anemiją rodo nedaug hemoglobino ir arba hematokrito. Hemolizine anemija padidėja raudonųjų kraujo ląstelių gamyba, todėl padidėja retikulocitų skaičius, nesubrendusios raudonosios kraujo kūnelės.

Prieš planuojant žmogaus naudojimą, būtina įrodyti gyvūnų modelių veiksmingumą ir saugumą. Mūsų grupė ir kiti anksčiau parodė šio požiūrio potencialą dominuojančiai paveldėtai neurologinei ligai DYT1 distonija, pasiekdami stiprią trumpaplaukę RNR shRNA -mediuotą ligos baltymo torsinA slopinimą kultivuotose ląstelėse.

Norint nustatyti šio požiūrio įgyvendinamumą in vivomes vykdėme viruso šRNA pristatymą dviejuose skirtinguose pelės modeliuose. Histologinė analizė parodė šRNR sukeltą neurodegeneraciją. Apibendrinant, mūsų tyrimai rodo, kad šRNR ekspresija žinduolių smegenyse gali sukelti mirtiną toksiškumą. Be to, genetinis graužikų fonas keičia jų jautrumą tokiai toksiškumo formai - tai veiksnys, į kurį reikia atsižvelgti rengiant ikiklinikinius gydymo RNR tyrimus.

Įvadas RNR trikdžių RNR terapija atsiranda kaip galinga strategija, skirta tylėti ligas sukeliančius alelius, suteikiant galimą gydymą anksčiau neišgydomoms ligoms. Keletas laboratorijų taikė gydomąją RNR neurodegeneracinės ligos, pvz.

Fresh articles

Tačiau, nepaisant šių ankstyvųjų ikiklinikinių tyrimų pažadų, neseniai paskelbtos ataskaitos kelia didelį susirūpinimą dėl šio gydymo būdo saugumo. Netikėtai nustatėme mirtiną toksiškumą, kurį sukėlė striatriška U6shRNA ekspresija abiejuose DYT1 pelės modeliuose, nesvarbu, koks buvo DYT1 mutacija, kaip tai buvo pastebėta ir laukinio tipo pelėse.

svorio netekimas Waltham ma amžiaus 43 negali prarasti svorio

Įdomu tai, kad genetinis fonas įtakojo pelių jautrumą šiam toksiškumui, pabrėždamas modelio pasirinkimo svarbą terapiniams tyrimams. Pirmasis yra neseniai sukurtas transgeninis modelis, ekspresuojantis žmogišką torA ΔE D9. Naudodamiesi šiomis pelėmis, mes siekėme parodyti stiprų alelio specifinį žmogaus torA slopinimą ΔE.

Massachusetts svorio kritimas

Mirtinos pasekmės U6shRNA ekspresijai pelės striatume. U6shTorA ekspresiją. Netikėtai, po 2—5 savaičių po injekcijos, mes nustatėme progresyvų svorio sumažėjimą ir reikšmingą tiek eksperimentinių, tiek kontrolinių šRNR letalumą, tuo tarpu pelėms, gaunančioms virusą, ekspresuojantį be shRNA, nebuvo pastebėta mirties 1c pav.

DYT1 mutacijos buvimas neturėjo įtakos šiam poveikiui. Nors šių pelių pilnas apibūdinimas bus paskelbtas kitur Ehrlich et al. Mirtingumas per pirmąsias 5 savaites po injekcijos buvo gerokai mažesnis nei DYT1 KI pelėms, nors jie gavo tuos pačius virusinius preparatus. GFP 1d svorio netekimas Waltham ma.

DYT1 KI ir transgeninių pelių mirtingumo dydžių ir laiko skirtumai buvo stebimi nepriklausomai nuo genotipo, o tai rodo, kad jie yra pelių genetinės kilmės pasekmė. Atviro lauko elgesio ir rotarodinės analizės rezultatų palyginimas neatskleidė reikšmingų pokyčių tarp laukinių ir KI pelių neparodyta. Dėl aukšto mirtingumo lygio, pastebėto DYT1 KI pelėms, po injekcijos elgsenos analizė negalėjo būti baigta. Dėl mažesnio ir vėlesnio mirštamumo, pastebėto D9.

Prieš ir po dviejų laiko taškų 6—8 ir 14—16 savaičių po injekcijos įrašėme jų rezultatus rotaciniame ir atvirame lauke.

Esant idiopatiniam cistitui derinyje su akmenlige — skiriama dieta subalansuotas ėdalasantispazmolitikai ir raminamieji pavyzdžiui, acepromazinas, fenoksibenzaminas ar diazepamas. Nustačius, kad šlapimo takuose yra bakterijų — skiriamas gydymas antimikrobinėmis medžiagomis pavyzdžiui, plačiai. Olinda, Brazil.

Variklio disfunkcija buvo pastebėta pelėms, švirkščiantoms U6shHtorA ΔE arba U6shMis, nepriklausomai nuo transgeno svorio netekimas Waltham ma, su padidėjusiu judėjimu atvirame lauke 2a pav. Ir blogesniu veikimu rotorode 2b pav. Striatų disfunkcija pelėms, švirkščiamos U6shRNA. Variklio aktyvumo ir funkcijos palyginimas prieš injekciją, 6—8 savaites ir 14—16 savaičių.

Visuose trijuose genotipuose pelėms, suleistoms arba su U6shMis, arba U6shHtorA ΔEpadidėjo motorinis aktyvumas tiek savaites, tiek 14—16 savaičių po injekcijos, kurios nebuvo stebėtos pelėms, švirkščiamoms be shRNA. Visuose trijuose genotipuose pelės, švirkščiamos su shMis arba shHtorA ΔEparodė sumažintą motorinį koordinavimą 6—8 savaičių ir 14—16 savaičių po injekcijos, lyginant su jokiu shRNA kontrole. Striatalų skyrių tyrimas atskleidė, kad daugelis U6shRNA injekuotų pelių smegenų parodė padidėjusius skilvelius 3a pav.

priežastys, dėl kurių svorio netenka

Buvo atlikta imunohistocheminė analizė, skirta aptikti DARPP ekspresiją, striatriškos vidutinio spyglių neuronų žymenį. Mes stebėjome DARPP signalo praradimą ir sumažėjusį GFP signalą transdukuoto pelių striatume, svorio netekimas Waltham ma bet kuriuo iš U6shRNR, bet ne smegenų, gavusių kontrolinį virusą 3b paveikslasrodantį transdukuotų neuronų praradimą.

ŠRNR svorio netekimas Waltham ma vektorių, bet ne kontrolinio viruso, transdukuoti regionai taip pat parodė sumažėjusį krezilinės violetinės spalvos dažymą, dar labiau rodo neurodegeneraciją 3c pav.

Svorio netekimas Waltham ma, šie rezultatai rodo, kad U6shRNR ekspresija sukėlė strialių medialinių smailių neuronų praradimą. Kaip aprašyta DARPP dažymui, sumažintas GFP signalas buvo pastebėtas kartu su padidėjusiu glialiniu fibriliniu rūgštiniu baltymu, parodantį transdukuotų neuronų praradimą ir pakeitimą astroglialinėmis ląstelėmis. Tačiau mes nepastebėjome skirtumų tarp Iba-1 ekspresijos neparodytamikroglijos aktyvinimo žymeklio. Pilno dydžio vaizdas Endogeninės miRNR kelio analizė Siekiant nustatyti, ar reikšmingas miRNR ekspresijos ar apdorojimo pokytis yra skirtingas abiejų kamienų jautrumas U6shRNR sukeltam toksiškumui, mes analizavome dviejų kandidatų miRNR ir svarbiausių miRNR komponento ekspresiją striatų audinyje, gautame iš kontrolinių gyvūnų iš abiejų pelių padermių.

Ekspresija ir apdorojimas abiejose padermėse nesiskyrė. Panašūs rezultatai gauti iš žievės audinių, gautų iš tų pačių gyvūnų neparodyta. Mes nustatėme, kad neperdirbtų pre-miRNR kiekių svorio netekimas Waltham ma pernelyg didelė shRNR ekspresija, bet brandžios krypties koncentracijos buvo labai kintamos, didėjant tendencijai 5a pav.

Įdomu tai, kad nors eksportas5 išraiška buvo beveik nepakitusi, Ago2 koncentracija buvo atvirkščiai koreliuoja su brandaus miRNR kiekio padidėjimu, pastebėtą šiauriniu blotingu kiekvienam gyvūnui 5b pav. Kiekybinis atvirkštinės transkripcijos-PCR, gautas brandus miR9 nepriklausomame gyvūnų rinkinyje, patvirtino šiaurinio bloto nustatymus 5c pav.

Vaistų sukelta hemolizine anemija, priežastys ir gydymas

Eksportuojamų 5, Ago2, neperdirbtų pre-miRNR ir brandžių miRNR lygiai tų pačių gyvūnų neužkrėstose žievės zonose nepasikeitė neįrodyta. Šie stebėjimai gali atsirasti dėl shRNAs poveikio endogeniniam miRNR keliui arba tiesiog atspindėti kintamą ląstelių mirtį ir astroglialinę reakciją, kurią sukelia toksinės shRNA.

U6 buvo pakrovimo kontrolė. Kiekviena juosta žymi miRNR arba baltymą, gautą iš kito gyvūno. Rodoma šiaurinės ir vakarų blot analizės kiekybinė išraiška vidurkis ± sem. Pilno dydžio vaizdas MikroRNR kelio analizė transdukuotame striatume. Išgauti gyvulių, švirkščiamų su vektoriais, koduojančiais shMis, shHtorA AE arba kontrolinį svorio netekimas Waltham ma, striata. Reikia pažymėti, kad abi juostos yra iš tos pačios dėmės, bet skirtingos ekspozicijos.

U6 rodomas kaip pakrovimo kontrolė. Šiaurės ir vakarų blot analizės pavyzdžiai, pateikti atitinkamai viršutinėje ir apatinėje plokštėse, buvo vykdomi ta pačia tvarka. U6shHtorA ΔE. Skirtumai buvo nedideli. Pilno dydžio vaizdas Diskusija Šiame tyrime mes parodome mirtiną toksiškumą, kurį sukelia terapinių RNRi tarpininkaujančių vektorių taikymas pelių neurologinės ligos modeliams.

Mūsų tyrimai rodo, kad pol-III transkribuoti šRNR, taikomi pelių striatumui, gali sukelti neuronų praradimą, elgesio sutrikimus ir gyvūnų žlugimą. Be to, naudojamų gyvūnų genetinis pagrindas pakeičia jautrumą šiam neigiamam poveikiui, nurodydamas, kad šis veiksnys turi būti apsvarstytas ir kontroliuojamas rengiant RNR tyrimus.

Šis tyrimas papildo mūsų svorio netekimas Waltham ma žinias apie terapinio geno slopinimą. RNAi terapija parodė didelį pažadą gydyti neurologinius sutrikimus. Terapiniai tyrimai buvo baigti arba vykdomi keleto neirologinių ligų gydymui, ir buvo pranešta apie ikiklinikinius įvairių neurologinių ligų modelius. Keletas DYT1 ląstelių modelių tyrimas padėjo kelią bandymams in vivo.

Akupresūra nurodo numesti svorio Adara klinikos nuostolio svoris Prolesan Pure — saugus svorio kritimas.

Taigi, šio tyrimo rezultatai rodo, kad ląstelių mirties arba uždegiminių atsakų trūkumas kultivuojamose ląstelėse in vivo nepasireiškia tikslinės sekos sauga, pabrėžiant būtinybę įvertinti neigiamo poveikio buvimą atitinkamame modelyje. Svarbus Kay ir kolegų tyrimas 2, kuriame jie susidūrė su gyvūnų žūtimi, nukreipdami genus į pelių hepatocitus, atkreipė svorio netekimas Waltham ma dėmesį į galimą šRNR toksiškumą ne nerviniuose audiniuose.

Panašiai kaip ir mūsų tyrime, tai atsitiko laukinių rūšių pelėms. Dauguma neurologinės ligos pelių modelių tyrimų buvo panaudoti virusų šRNR ir daugiausia dėmesio skiriama veiksmingumo demonstravimui. Pavyzdžiui, nukreipiant mutantinį medžioklį Huntingtono ligos transgeninėse pelėse, Rodriguez-Lebron ir kt.

Be to, Davidsonas ir kolegos 15 nustatė, kad laukinės rūšies pelėms, švirkščiamoms vienu iš jų terapinių šRNR, Huntingtono liga, pasireiškė lengvas ir trumpalaikis fenotipinis pablogėjimas. Ta pati grupė parodė toksiškumą su mikroglijos aktyvavimu, kai intraveninis ShRNA perdavimas vyko Huntingtono ligos pelės modelyje, manoma, kad jis atsiranda dėl poveikio, nukreipto netinkamai.

Mūsų tyrimas papildo šiuos pranešimus, demonstruodamas striatų atrofiją, susijusią su elgesio sutrikimais ir mirtimi. Svarbu pabrėžti, kad susidūrėme su tokiu pačiu toksiškumo lygiu laukinio tipo nei DYT1 pelėms. Tai turi reikšmingų pasekmių ikiklinikiniams tolerancijos tyrimams, kuriais svorio netekimas Waltham ma optimizuoti shRNA, kad būtų sumažintas sukeltas toksiškumas, nepriklausomai nuo modelio. Dar daugiau, nes šios toksiškos konstrukcijos sukėlė ląstelių netekimą ne ligų pelėms, todėl gali būti, kad kai kurios ligos, kurioms būdinga neurodegeneracija, gali būti paspartintos taikant šiuos vektorius.

Šie tyrimai bendrai rodo, kad pirmosios vektorių kartos, pagrįstos labai ekspresuotais pol-III varikliais, nėra optimalios terapiniam vystymuisi ir turėtų būti optimizuotos ir atidžiai įvertintos dėl galimo toksiškumo. Buvo sukurtos skirtingos strategijos, leidžiančios panaikinti toksiškus labai išreikštų šRNR šalutinius poveikius, pvz.

Nors keletas mechanizmų gali sukelti nepageidaujamą ŠRNR poveikį, atsirandantys įrodymai rodo, kad endogeninio miRNR kelio disfunkcija, atsiradusi dėl prisotinimo iš išorinių konstrukcijų, yra labiausiai tikėtinas mechanizmas. Mūsų skirtingi shRNR konstruktai buvo išreikšti iš U6 promotoriaus ir, bent jau kultivuotose ląstelėse, labai stipriai nutildo savo taikinius, o tai rodo aukštą ekspresijos lygį.

Nors prognozuojama, kad gyvūnai žūva nuo išsivysčiusių kepenų nepakankamumo, mirties, kurią sukelia riboto striatumo regiono praradimas, nėra toks intuityvus. Vis dėlto neseniai McManusas ir kolegos 19 parodė, kad miRNR krypties disfunkcija, kurią sukelia sąlyginis dicerio ištrynimas pogimdyminės pelės striatrijos vidutinio spyglių neuronuose, lemia progresuojančią motorinę disfunkciją, sumažėjusį smegenų dydį, švaistymą ir mirtį nuo 10 iki 12 savaičių amžiaus.

Waltham veterinarijos dieta

Taigi, miRNR kelio disfunkcija strialių neuronuose gali sukelti progresuojančią variklio disfunkciją ir mirtį. Kodėl toksiniai šRNR sukėlė padidėjusį lokomotorinį aktyvumą, yra neaiškus, tačiau galbūt tai gali būti dėl transdukcijos efektyvumo arba jautrumo tokiam toksiškumui tarp vidutinių smailių neuronų, dalyvaujančių tiesioginiame ar netiesioginiame kelyje.

Įdomus ir netikėtas mūsų tyrimų rezultatas yra skirtingas jautrumas šRNR sukeltam neigiamam poveikiui tarp dviejų dažniausiai naudojamų pelių genetinių fonų, kurie svorio netekimas Waltham ma reikšmingų skirtumų genų ekspresijos lygiu smegenų audinyje. Toksiškų šRNR ekspresija nepasikeitė eksportuojančių 5 lygių, bet sukėlė endogeninės Ago2 ir svorio netekimas Waltham ma ekspresijos kintamumą. Įdomu tai, kad Ago2 lygiai atvirkščiai koreliuoja su brandžių miRNR kaupimu. Savo pradinėje kepenų toksiškumo ataskaitoje Grimm et al.

Tačiau svorio netekimas Waltham ma pati grupė neseniai nustatė, kad Ago2 yra RNR veiksmingumo, toksiškumo ir patvarumo rodiklis. Kodėl Ago2 lygiai kinta po toksinių šRNR ekspresijos ir kodėl tai koreliuoja su aukštesniais miR9 lygiais yra neaišku, ir gali tiesiog atspindėti audinių architektūros pokyčius, atsiradusius dėl neuronų degeneracijos ir glialinės reakcijos.

10 svorio netekimas a1c

Be to, neaišku, kaip sumažėjo Ago2 ekspresija miR9 lygiu. Eksportavimo5 ir Ago2 ekspresijos manipuliavimas ant toksinių šRNR neuronų taikymo padėtų išbandyti šią hipotezę, neatsižvelgiant į tai, kokia yra galutinė šių skirtumų priežastis, nors mokslininkai turėtų atidžiai apsvarstyti gyvūnų modelio, naudojamo ikiklinikinių RNR terapijos tyrimų metu, foną.

Apibendrinant galima pasakyti, kad šis tyrimas parodo mirtiną toksiškumą, kurį sukelia striatų striatrijos ekspresija, ir iliustruoja skirtumus, atsiradusius dėl modelio, naudojamo terapiniams slopinimo tyrimams, genetinio fono.

work — Coming Soon

Šie rezultatai turi reikšmingą poveikį ikiklinikinių terapinių RNR tyrimų, skirtų žmogaus neurologinės ligos modeliams, kūrimui. Šio modelio generavimas ir apibūdinimas bus aprašytas kitur Ehrlich et alrankraštis ruošiant.

svorio netekimas Waltham ma g4 riebalų degintojas

Pelės buvo patalpintos temperatūros kontroliuojamuose kambariuose, kuriuose buvo 12 val. Šviesūs ir tamsūs ciklai. Maistas ir vanduo buvo ad libitum. Visus eksperimentinius protokolus patvirtino Ajovos svorio netekimas Waltham ma Gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas. Šiame tyrime naudojamos tikslinės sekos anksčiau buvo aprašytos Gonzalez-Alegre et al.

Pabaigus, adata buvo pakelta 0, 3 mm, o paskui palikta dar 5 minutes, kad būtų galima difuzija ir išvengta tirpalo plitimo pipete. Elgesio analizė Rotarod našumas. Trumpai tariant, pelės pirmą kartą buvo aklimatizuotos į rotorodą svorio netekimas Waltham ma 47 Ugo Basile, Milanas, Italija 3 min pastoviu 4 aps.

Greičiu apsisukimų per minutę ir po to greičiu nuo 4 iki 16 aps.

Pelės buvo ištirtos 3 dienas, 3 kartus per dieną atlikus rotorodą, nustatytą pagreitinti nuo 4 iki 40 aps. Per 5 min.

Osteria Posto - Waltham, MA (Phantom Gourmet)

Latentinis kritimas buvo užfiksuotas kiekvieną dieną, o didžiausias ribinis nuokrypis - s. Pelės, kurios važinėjo besisukančiu strypu tris pilnus apsisukimus be judėjimo, buvo pašalintos dėl neveiklumo. Pelės, kurios negalėjo likti ant aparato mažiausiai s, nebuvo dedamos į injekcijos grupes.

  1. Anotacija FAKTAS: Didelės baltymų HP dietos energijos ribojimo metu buvo išsamiai ištirtos atsižvelgiant į jų gebėjimą mažinti kūno riebalus ir išsaugoti liesą kūno masę, tačiau mažai žinoma apie jų poveikį baltymų metabolizmui liesuose audiniuose.
  2. Supratimas apie vaistų sukeltą hemolizinę anemiją

Atidaryti svorio netekimas orem. Po aklimatizacijos keturios pelės buvo užregistruotos tuo pačiu metu, dedant jas į atvirą svorio netekimas Waltham ma su keturiais atskirais 25 cm × 25 cm laukais.

Imunohistocheminė analizė atlikta kaip aprašyta anksčiau. Netiesioginio imunofluorescencijos atveju sekcijos buvo inkubuojamos su Cy3 konjuguotais monokloniniais glialfibriliniais rūgščių baltymų antikūnais Sigma, St Louis, MO, JAV ir apdoroti, kaip aprašyta anksčiau 8 prieš vizualizaciją. Kresilo violetinis dažymas buvo atliktas pagal standartinius protokolus. Molekuliniai tyrimai RNR izoliacija. Northern blotting.